Un equipo de investigadores pertenecientes al área de Química y Microbiología del Agua del Instituto de Ingeniería del Agua y Medio Ambiente de la Universitat Politècnica de València (IIAMA-UPV) ha desarrollado un protocolo de detección simultánea de tres especies patógenas de Legionella spp (L. pneumophila, L. micdadei y L. longbeachae) que permite localizar el foco de la infección en apenas ocho horas.
El desarrollo de este nuevo protocolo es el resultado de un proyecto fin de carrera dirigido por los investigadores Yolanda Moreno Trigos y Jorge García Hernández, y su innovación radica en el uso de un sistema de detección enzimático mediante una PCR-múltiple (reacción en cadena de la polimerasa) acoplada a un pre-tratamiento con PMA (propidio monoazida) que determina su viabilidad en un breve espacio de tiempo, "por lo que no es necesario que crezca la bacteria en un medio sintético de laboratorio y luego identificarla, como se realiza con el método tradicional", indica Moreno.
El tratamiento previo con PMA permite descartar el ADN de células muertas
El proyecto nace, inicialmente, de un estudio realizado por un grupo de investigadores japoneses que pretendían localizar simultáneamente cuatro especies de Legionella. Sin embargo, los científicos del IIAMA-UPV, tras comprobar la no viabilidad de esta opción, realizaron la experimentación con 3 especies. Además, incorporaron el tratamiento con PMA y una PCR-múltiple clave para el éxito del proyecto.
"Nosotros", explica Moreno, "concentramos la muestra, rompemos la bacteria para extraer el ADN y luego identificamos las diferentes especies de Legionella mediante PCR-múltiple. El tratamiento previo con PMA nos permite descartar el ADN de las células muertas, por lo que sólo consideramos las células viables, que es otra de las grandes diferencias respecto al método de cultivo, ya que en una muestra ambiental puedes tener células viables no cultivables".
El procedimiento más extendido en la actualidad tarda 14 días en generar resultados
Esta técnica pionera contrasta con el procedimiento más extendido de detección, que se realiza a través de métodos culturales y tarda catorce días en generar resultados. Con este sistema, según apuntan desde el IIAMA-UPV, no se pueden detectar las bacterias viables no cultivables y hay muchas dificultades de aislamiento en muestras muy contaminadas.
"Este avance va a permitir localizar simultáneamente las tres especies de Legionella más importantes. Entre ellas, se encuentra la L. pneumophila, que es la que más frecuentemente se aísla en el hombre, ya que se encuentra presente en el 90% de los casos y se manifiesta a través de la infección pulmonar o enfermedad del legionario y la fiebre de Pontiac", destaca Moreno.
La primera se caracteriza por ser la forma más severa de contagio con neumonía, fiebre alta, escalofríos y tos seca, mientras que la segunda es menos grave y está asociada a dolores musculares y síntomas gripales.
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