Registro en tiempo real de la actividad transcripcional en ensayos de transactivacion en chopos

Los ensayos de transactivacion han sido aplicados en muchas especies vegetales con el fin de analizar la actividad de factores de transcripción a un tiempo concreto. El registro en tiempo real de la actividad transcripcional usando ensayos transitorios, abre nuevas perspectivas para el análisis de la regulación de la transcripción en plantas.

Nosotros hemos creado y validado en chopo una línea estable reportera estable basada en el gen del reloj circadiano PtaLHY2, la cual puede ser usada para investigar regulación de la transcripción y transducción de señales en chopo. Usando esta línea, hemos desarrollado una metodología para evaluar de forma rápida la actividad de potenciales reguladores de los ritmos diurno y circadiano. De esta forma hemos demostrado que la proteína remodeladora de la cromatina HMGB2/3, activa la transcripción de PtaLHY2 dentro su ventana temporal de actividad.

Publicación Original:

Ramos-Sánchez, JM; Triozzi, PM; Moreno-Cortés, A; Conde, D; Perales, M; Allona, I. 2017. "Real-time monitoring of PtaHMGB activity in poplar transactivation assays". Plant Methods. DOI: 10.1186/s13007-017-0199-x".

Imagen: Determinacion de la abundancia de las proteínas PtaHMGB2/3 y PtaHMGB6 seguido por el ensayo de transactivacion usando el reportero pPtaLHY2::LUC